當前位置:主頁 > 技術文章 > elisa試劑盒的這些檢測方法分別都有哪些優缺點?

                      elisa試劑盒的這些檢測方法分別都有哪些優缺點?

                      時間:2022-11-28 點擊次數:32
                        elisa試劑盒是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術。酶聯免疫吸附試驗的標準程序,通常是把蛋白、抗體、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗體固定在固相載體上,再加入一級檢測抗體,形成一個抗原抗體的復合物。如果該抗體已經用酶標記了,即可用來直接測定抗原的量,若無,則可利用另一個酶標記的二級抗體來測定抗原的量。測定抗原量的方法是加入該酶的底質,作用后產生出現的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關系,依此原理計算出樣本中的抗原總量或濃度。
                        1.直接法
                        將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。
                        優勢:操作手續簡短,因無須使用二抗可避免交互反應。
                        缺點:試驗中的一抗都得用酶標記,但不是每種抗體都適合做標記,費用相對提高。
                        2.間接法
                        elisa試劑盒此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標記,改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
                        優勢:二抗可以加強信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的一級抗體則能保留它多的免疫反應性。
                        缺點:交互反應發生的機率較高。
                        3.雙抗體夾心法
                        被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,其中一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體,此抗體可用酶標記后直接測定抗原的量;或不標記,再透過酶標記的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取,才可避免交互反應或競爭相同的抗原結合部位。
                        優勢:高靈敏、高專一性,抗原無須事先純化。
                        缺點:抗原一定得擁有兩個以上的抗體結合部位。
                        4.競爭法
                        elisa試劑盒樣本里的抗原(自由抗原)和純化并固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一起競爭相同的抗體,當樣品里的自由抗原越多,就可以結合越多的抗體,而固定抗原就只能結合到較少的抗體,反之亦然。經清洗步驟,洗去自由抗原和抗體的復合物,只留下固定抗原和抗體的復合物,拿來與只有固定抗原的對照組結果相比較,根據呈色差異就可計算出樣品里的抗原含量。
                        優勢:可適用比較不純的樣本,而且數據再現性很高。
                        缺點:整體的敏感性和專一性都較差。

                      上一篇:沒有了

                      下一篇:選購Gibco/HyClone胎牛血清的標準有哪些?

                      版權所有 © 2022 上海銘博生物科技有限公司 備案號:滬ICP備15037298號-1 技術支持:化工儀器網 管理登陸 sitemap.xml

                      點擊咨詢 聯系方式 二維碼

                      服務熱線

                      021-55825868

                      掃一掃,關注我們

                      ag真人官方