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                      MB脂肪酸β氧化速率比色法檢測試劑盒產品說明書(中文版)
                      時間:2021/3/10 點擊次數:1079

                      MB50679 v.A

                       

                        脂肪酸β氧化速率比色法檢測試劑盒產品說明書(中文版)

                       

                      主要用途

                       

                        脂肪酸β氧化速率(β oxidation rate)比色法檢測試劑是一種旨在通過棕櫚酰肉堿氧化依賴性鐵*還原,即單位時間還原產物峰值降低即采用比色法來測定線粒體裂解樣品中脂肪酸β氧化速率*而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的其適用于各種細胞、組織中線粒體裂解懸液樣品(動物、人體等)脂肪酸β氧化速率的檢測。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定。

                       

                      技術背景

                       

                      脂肪酸β氧化過程(β-oxidation)在動物組織的線粒體發生的脂肪酸代謝通路,可概括為活化、轉移、β氧化及后經三羧酸循環被*氧化生成CO2H2O,并釋放能量等四個階段,是體內,尤其是組織器官,例如肝臟、心臟和骨骼肌等能量內平衡的關鍵代謝通路。食物中甘油三酯提供體內三分之一的能量供給,骨骼肌和心臟消耗80%的總能量。脂肪酸代謝異常,將導致脂質聚集在非脂肪組織內,產生慢性病的病理基礎,例如糖尿病、心衰、肥胖癥等。其中β氧化,包括脫氫、水合、二次脫氫和硫解,是將活化的各種長度脂酰輔酶酯(acyl CoA esters)不斷縮短為乙酰輔酶Aacetyl CoA)單位,后經過三羧酸循環和呼吸鏈氧化成CO2和水。脂酰基輔酶A脫氫酶(acyl CoA dehydrogenaseADEC.1.3.99.3)是脂肪酸代謝進入β-氧化后工作的重要酶之一。通過底物棕櫚酰肉堿(palmitoyl carnitine)的氧化產生的電子,由鐵*(ferricyanide)捕獲而還原,其還原速率的檢測,來評價β氧化的速率,即吸光值(420nm波長)的下降與時間的對應關系。

                                                    

                      產品內容

                       

                        緩沖液(Reagent A  20毫升

                        反應液(Reagent B   2毫升

                        底物液AReagent C   1毫升

                        底物液BReagent D   1毫升

                        陰性液(Reagent E     1毫升

                      產品說明書      1

                       

                      保存方式

                       

                      保存  反應液(Reagent B)、  底物液AReagent C)和  底物液BReagent D在-20冰箱里其余的保存在4冰箱里;  底物液AReagent C)和  底物液BReagent D避免光照;有效保證6

                       

                      用戶自備

                       

                      1.5毫升離心管:用于反應操作的容器

                      比色皿:用于比色的容器

                      分光光度儀:用于比色分析

                       

                      實驗步驟

                       

                      • 測定準備

                       

                      • 準備好待測樣品(例如純化線粒體),至于冰槽里備用
                      • 開啟并設定好分光光度儀(溫度為25℃):波長420nm470nm,間隔1分鐘,讀數6次(共5分鐘),并置零 
                      • 從-20℃冰箱里取出試劑置于冰槽里融化;  底物液AReagent C  底物液BReagent D避免光照
                      •   緩沖液(Reagent A室溫下均衡溫度
                      文件下載    

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